发布时间：2025-08-21
朋友们好呀！这里是你们的老朋友小实，今天要和大家聊一个实验室里经久不衰的话题——"回收后的一抗到底能用多少次？" 一抗回收：实验室的"传家宝"？ 相信每个做过Western blot的小伙伴都经历过这样的内心挣扎：每次做完实验，看着那些昂贵的一抗溶液，倒掉吧，肉疼；留着吧，又不知道下次还能不能用。于是，实验室里就出现了各种"祖传"一抗------有的标签已经模糊到看不清，有的甚至传了好几届师兄师姐... 我们实验室就有一位"节俭模范"张师兄，他的一抗用了整整两年，直到某天实验结果突然全阴性，才恋恋不舍地"退休"那管抗体。那么问题来了：这种"传家宝"式用法科学吗？一抗回收使用到底有没有次数限制？ 科学解析：一抗能重复使用的原理 要回答这个问题，我们得先了解一抗重复使用的科学基础。一抗溶液中含有大量未结合的抗体分子，每次孵育膜时，只有部分抗体与目标蛋白结合。回收的一抗中仍然存在大量有活性的抗体，这就是重复使用的基础。 但！是！抗体活性会随着使用次数逐渐降低 主要原因包括：反复冻融导致的蛋白变性，长时间保存中的蛋白降解，实验操作引入的细菌污染，膜上残留的试剂对抗体的影响。 根据《Nature Protocols》和《Current Protocols》等权威实验指南的建议： 但请注意！这些数字只是参考范围，具体次数还要考虑以下因素： 影响使用次数的关键因素 1.保存条件：4℃保存比反复冻融要好得多。加入0.02%叠氮化钠可以防止细菌污染。 2.抗体浓度：高浓度抗体比低浓度的更"耐用"。如果你每次都用到极限稀释度，那么回收次数自然会减少。 3.抗体类型：多抗通常比单抗更稳定；某些特殊修饰抗体（如磷酸化抗体）更容易失活。 4.实验严格程度：定量实验比定性实验要求更高，回收次数应相应减少。 实用判断标准 与其死记硬背使用次数，不如学会判断抗体是否"退休"的科学方法： 1.信号减弱：与新鲜抗体对比，信号强度下降超过50%就该换了 2.背景增高：非特异性结合明显增加是抗体降解的信号 3.实验结果不稳定：重复实验差异增大时考虑抗体因素 4.出现沉淀：溶液变浑浊或有可见沉淀物 特殊抗体要特殊对待 有些抗体特别"娇气"，需要额外注意： 回到最初的问题：回收后的一抗到底能用多少次？ 最后提醒大家：在科研中，有时候"省小钱"反而会"花大钱"。一抗虽贵，但重复使用导致实验失败浪费的时间和样品可能更昂贵。找到平衡点才是王道！ 优品生物抗体推荐 优品生物抗体在这方面做得相当不错，我们的抗体不仅效价高、特异性好，而且稳定性强，都经过特殊的稳定化处理，就像给抗体穿了件"防护服"，大大延长了抗体的使用寿命。对于经常需要重复使用抗体的实验室来说，选择这种高品质抗体反而能降低总体实验成本呢！
常规一抗：在4℃保存条件下，可重复使用5-10次
珍贵抗体：可适当延长至15次左右
酸化抗体等特殊抗体：建议不超过5次
磷酸化抗体：对降解特别敏感，建议不超过3-5次
生物素标记抗体：容易受到样品中生物素干扰
荧光标记抗体：光敏感，要注意避光保存
在理想保存条件下，大多数抗体可重复使用5-10次，但必须根据实际信号强度和实验要求灵活调整。
