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人免疫球蛋白G抗体(IgG-Ab)检测试剂盒

货号: YPGX0893
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产品介绍

反应种属
检测范围
阴性或阳性
灵敏度
物理性能
各液体组分澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。
用途
仅供科研使用,定性检测血清、血浆、细胞培养上清液中人免疫球蛋白G抗体(IgG-Ab)。
实验原理
/
特异性
本试剂盒识别天然和重组人免疫球蛋白G抗体(IgG-Ab),与结构类似物无交叉。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
回收率
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试验所需自备试验器材
1、标准规格酶标仪。2、自动洗板机。3、振荡器。4、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
操作程序
1、所有试剂和组分都先恢复到室温,阴阳性对照和样品,建议做复孔。2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。4、设置阴阳性对照、样本孔和空白孔,阴阳性对照孔各加阴阳性对照50μL,样本孔加适当稀释后的待测样本50μL,空白孔不加,用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。6、除空白孔外,阴阳性对照孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。7、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育30min。8、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。9、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育15min。10、所有孔加入终止液50μL,在450nm酶标仪上读取各孔吸光度(OD值)。
注意事项
1)本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。2)试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。3)严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。4)洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。5)消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。6)底物显色液应呈无色或很浅的颜色。7)避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。8)在储存和温育时避免强光直接照射。9)平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。10)任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。11)检测使用的酶标仪需要安装能检测 450±10nm 波长的滤光片,光密度范围在0-3.5 之间。建议使用时提前 15 分钟预热。12)请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。13)试验中所用的 EP 管和吸头均为一次性使用,严禁混用。14)请勿使用过期的试剂。
问题分析
①问题描述:阴阳性对照结果不稳定可能原因及相应对策:1.吸液或加液不准——检查移液器及吸头2.平衡时间太短——保证充足的平衡时间3.洗涤不完全——保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量②问题描述:显色很弱或无色可能原因及相应对策:1.孵育时间太短——保证充足的孵育时间2.实验温度不正确——使用推荐的实验温度3.试剂体积不够或漏加/稀释不正确——检查吸液及加液过程,保证所有试剂按顺序足量添加 4.酶标记物失活或底物失效——混合酶结合物和底物,通过迅速显色来检查判断③问题描述:读数数值低可能原因及相应对策:1.酶标仪设置不正确——在酶标仪上检查波长及滤光片设置/提前打开酶标仪预热④问题描述:变异系数大可能原因及相应对策:1.加液不正确——检查加液情况⑤问题描述:背景值高可能原因及相应对策:1.检测抗体的工作浓度过高——使用推荐的稀释倍数2.酶标板洗涤不完全——保证每步清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞;是否使用试剂盒配备的洗涤液3.洗液有污染——配制新的洗液⑥问题描述:灵敏度低可能原因及相应对策:1.ELISA试剂盒保存不当——按说明书要求保存相关试剂2.读数前未终止——OD读数前应在每孔中加入终止液
声明
试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。

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