检测范围
0.25 ng/mL – 8 ng/mL
物理性能
各液体组分澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装，无破损漏气。
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中小鼠抗猪 PRV Bartha K61 毒株 IgG 抗 体（PRV Bartha K61 IgG）的浓度
实验原理
本试剂盒采用间接两步法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被猪 PRV Bartha K61 毒株蛋白 （固相抗原）的微孔酶标板中，加入不同浓度校准品和待测样本，经过温育与充分洗涤，去除 未结合的组分，再加入抗小鼠 IgG-HRP（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组 分，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，产生蓝色产物，在终止液作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD 值）， 吸光度（OD 值）与待测样品中待测抗体的浓度呈正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本待测抗体的浓度。
试验所需自备试验器材
1.标准规格酶标仪。 2.自动洗板机。 3.振荡器。 4.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器。
操作程序
推荐样本稀释方案：建议老师先做预实验摸索样本最佳稀释倍数，然后再做正式实验。 1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。 2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。 3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 4、设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL，样本孔加待测样 本 50μL，空白孔不加，用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育 30min。 5、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 20s，甩去洗涤液，吸水纸 上拍干。如此重复 4 次（共洗板 5 次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板， 添加浸泡 20s 的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上， 充分拍干反应板。 6、除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体 100μL。 7、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育 30min。 8、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 20s，甩去洗涤液，吸水纸 上拍干。如此重复 4 次（共洗板 5 次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板， 添加浸泡 20s 的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上， 充分拍干反应板。 9、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应 板，37℃水浴锅或恒温箱温育 15min。10、所有孔加入终止液 50μL，在酶标仪 450nm 波长下读取各孔吸光度（OD 值）。
注意事项
1)本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断。 2)试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时，请 按国家生物试验室安全防护条例执行。 3)严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。 4)洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。 5)消除板底残留的液体和手指印，否则影响 OD 值。 6)底物显色液应呈无色或很浅的颜色。 7)避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。 8)在储存和温育时避免强光直接照射。 9)平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。 10)任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂 盒中反应试剂的生物活性。 11)检测使用的酶标仪需要安装能检测 450±10nm 波长的滤光片，光密度范围在 0-3.5 之间。建议使用时提前 15 分钟预热。 12)请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。 13)试验中所用的 EP 管和吸头均为一次性使用，严禁混用。 14)请勿使用过期的试剂。
