发布时间：2026-03-27
摘要
目的：酒精性肝病（ALD）是肝细胞癌的病因之一，并伴随肠道渗漏和微生物群变化。葛根对肝损伤具有保护作用。本研究旨在探讨葛根治疗ALD的机制。采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q/TOF-MS）分析葛根提取物（PUE）的成分。
方法：通过建立急性和慢性ALD模型，评估PUE的抗酒精和保肝效果。结果显示，PUE治疗降低了血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）的水平以及炎症因子水平，减轻了肝脏炎症和醉酒状态。PUE通过下调乙醇脱氢酶1（ADH1）的基因表达和血清乙醛（ACH）水平，抑制了乙醇代谢生成ACH，同时上调乙醛脱氢酶2（ALDH2）的基因水平以加速ACH分解，从而减轻肝脏炎症和肠道屏障损伤。同时，16S rDNA测序显示，PUE改变了微生物群组成，减少了变形菌门和脱硫杆菌门的丰度，从而抑制了脂多糖（LPS）的生成及其下游Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核因子κB（NF-κB）通路。PUE还增加了拟杆菌属、瘤胃球菌属和普雷沃氏菌属的丰度，并产生短链脂肪酸（SCFAs）以保护肠壁。
结论：粪便微生物群移植（FMT）治疗进一步证实，PUE以肠道微生物群依赖的方式缓解ALD。因此，PUE通过调节肠道微生物群和抑制乙醇代谢，经由肝-肠-脑轴缓解ALD，未来具有良好的应用前景。
关键词：
酒精性肝病，肠道微生物群，野葛根，脂多糖，肝-肠-脑轴
核心内容
酒精性肝病（ALD）主要由长期或过量饮酒引起，可从酒精性肝炎、脂肪肝发展为肝纤维化、肝硬化甚至肝细胞癌。肝-肠-脑轴参与了ALD的形成。酒精在肝脏中代谢为乙醛（ACH），增加肠道通透性，破坏肠道菌群，使脂多糖（LPS）从肠腔转移至循环系统。随后，LPS与肝脏中的Toll样受体4（TLR4）结合，激活MyD88/NF-κB通路，上调促炎细胞因子水平，进一步加剧肝脏氧化损伤。同时，炎症因子和LPS通过迷走神经和血脑屏障进入大脑，引起神经炎症，导致运动迟缓、肢体无力及翻正反射丧失。葛根是一种药食同源植物，富含黄酮类、三萜类和多糖，对脑、肝、心和生殖系统有保护作用。目前，葛根治疗肝损伤的研究多集中于非酒精性肝病，对ALD的研究较少，且多集中于异黄酮和多糖等单体。由于肝-肠-脑轴的存在以及酒精对肠道和肝脏的共同损伤，葛根治疗ALD的机制尚不明确，有待充分阐明。
研究流程示例
葛根提取物（PUE）制备： 新鲜葛根用80%乙醇浸泡过夜，80℃提取2小时，上清液真空旋蒸干燥，得到PUE。
成分分析：
采用紫外-可见分光光度法（UV-Vis）测定PUE中总黄酮、总多糖、总多酚、总皂苷和总蛋白的含量。
采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）结合示差折光检测器（RID）分析多糖的分子量分布。
采用UPLC-Q/TOF-MS对PUE中的化合物进行定性分析。
采用高效液相色谱（HPLC）对四种典型异黄酮（葛根素、大豆苷、染料木苷和芒柄花素）进行定量分析。
动物实验：
急性ALD模型： 小鼠连续3天灌胃PUE（低、高剂量）或生理盐水，末次给药30分钟后灌胃酒精，随后进行行为学测试（翻正反射、旷场、爬杆、平衡木）并检测血清ALT/AST水平。
慢性ALD模型： 小鼠连续4周每天灌胃PUE或生理盐水，30分钟后灌胃酒精。收集血液、肝脏、回肠及内容物，进行生化指标检测、组织病理学分析、转录组测序、实时定量PCR（RT-PCR）、Western Blot和16S rDNA测序。
粪便微生物群移植（FMT）： 受体小鼠经抗生素处理清除肠道菌群后，分别接受模型组或PUE处理组小鼠的粪便悬液灌胃，同时给予酒精，以验证肠道菌群在PUE治疗ALD中的作用。
行为学测试： 包括翻正反射丧失（LORR）、平衡木实验、爬杆实验、旷场实验、机械痛阈测试和跳台实验。
其他检测： 包括血清生化指标（ALT、AST、TC、TG）、炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）和LPS水平、血浆乙醛含量、肝脏和结肠组织病理学（H&E染色）、肠道紧密连接蛋白（ZO-1、occludin）表达、粪便中SCFAs含量测定以及肝脏转录组测序和RT-PCR验证。
讨论与总结
本研究证实，葛根提取物（PUE）通过调节肝-肠-脑轴，对酒精性肝病具有显著的治疗效果。其机制主要包括两个方面：
调节酒精代谢： PUE通过抑制ADH1活性，减少酒精向乙醛的转化，同时激活ALDH2，加速乙醛分解，从而降低体内乙醛蓄积，减轻其对肝脏和肠道的直接毒性。
调节肠道菌群： PUE富集了产SCFAs的有益菌（如拟杆菌属、瘤胃球菌属、普雷沃氏菌属），增加SCFAs水平，从而修复肠道屏障功能，减少LPS渗漏。LPS进入肝脏后，通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路引发的炎症反应也随之被抑制。
此外，PUE还降低了血清炎症因子水平，减轻了由炎症信号通过肠-脑轴传递引起的神经炎症和行为异常。
未来研究
1. 活性成分精准解析
分离鉴定PUE中起关键作用的多糖（2.05 kDa）与异黄酮类成分，探究其协同作用机制，明确“成分-靶点-菌群”的对应关系。
2. 肝-肠-脑轴关键节点验证
利用基因敲除、神经阻断等技术，验证TLR4/MyD88/NF-κB通路及迷走神经在PUE治疗中的核心地位，明确SCFAs作为信号分子的作用。
3. 肠道菌群功能验证
采用无菌动物模型与单一菌定植技术，直接验证关键菌属（如拟杆菌属、瘤胃球菌属）在PUE缓解ALD中的必要性。
4. 临床转化探索
开展小样本临床试验，评估葛根提取物在ALD患者中的有效性与安全性，开发具有辅助保肝、解酒功能的标准化产品。
5. 长期安全性评价
系统评估PUE长期使用的安全性及其对药物代谢酶的影响，为临床应用奠定基础。
文献推荐
IF5.7
Pueraria Extract Ameliorates Alcoholic Liver Disease via the Liver–Gut–Brain Axis: Focus on Restoring the Intestinal Barrier and Inhibiting Alcohol Metabolism
1.YP-Ab-13947/YP-mAb-13947anti-MyD88 antibody
2.anti-NF-κB antibody
3.YP-mAb-18349anti-ZO-1 antibody
