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ELISA复孔差异大?6大翻车原因+解决方案全解析!

发布时间:2025-07-17

Part 1:ELISA复孔差异大的6大原因 & 解决方案

1️⃣ 样本处理不当(头号杀手!)

❌ 问题:样本未离心、反复冻融、粘度过高
✅ 解决:血清/血浆3000rpm离心10分钟分装保存,避免反复冻融细胞裂解液稀释至合适浓度

 加样误差(手抖党看这里)

❌ 问题:枪头未贴壁、加样速度不一
✅ 解决:使用多通道移液器枪头45°贴壁,缓慢加样

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洗板不彻底/过度

❌ 问题:残留导致高背景,或洗脱结合抗体
✅ 解决:手工洗板:注满洗液,静置30秒,甩干×3次

机洗:定期校准洗板机

孵育条件不稳定

❌ 问题:温度波动、时间不一致
✅ 解决:使用恒温孵育箱(37℃±0.5℃)严格计时,避免人为误差

 试剂/抗体问题

❌ 问题:抗体批间差大、显色液失效
✅ 解决:选择优品生物ELISA试剂盒:预包被板批内差<5%即用型显色液,稳定性长达6个月

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Part 2:复孔数据还能用吗?

判断标准

CV<15%:数据可靠,取平均值

CV 15%-20%:谨慎使用,建议验证

CV>20%:建议重做

 数据处理技巧:用Grubbs检验剔除异常值趋势一致但绝对值差异大?改用相对表达

Part 3:为什么选优品生物ELISA?

 三大核心优势
1️⃣ 预制板工艺:机器人点样,孔间均一性>98%
2️⃣ 抗体配对优化:捕获/检测抗体高亲和力匹配,避免钩状效应
3️⃣ 全程质控:每批次提供QC数据(含复孔CV值)

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