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抗体测评(WB)|这3支抗体凭什么媲美国际品牌?

发布时间:2025-06-11

1.Human NSE

NSE(神经元特异性烯醇化酶)是神经内分泌肿瘤的特异性标志物,参与糖酵解途径并在神经细胞能量代谢中起关键作用。其理论分子量为47 kDa,但在WB实验中常面临以下挑战:


迁移位置异常:因二聚体形成或糖基化修饰导致条带偏移(40-55 kDa范围)


非特异性条带:与烯醇化酶家族其他成员(如ENO1)交叉反应


组织表达特异性:在非神经组织中表达量极低,检测灵敏度要求高

WB应用测评设计


测评维度


对比品牌

主流品牌:Abcam

国产品牌:优品生物

关键结论:

高特异性:优品生物抗体在siRNA沉默样本中无杂带,47 kDa主条带清晰;


灵敏度突出:在10 μg脑组织上样量下仍可稳定检测,灵敏度较进口品牌提升20%;


修饰耐受性:不同病理样本中条带位置一致(47±3 kDa),不受二聚化影响;


性价比优势:价格比进口品牌低40%,适配WB、IHC等多场景应用;


实验方案优化建议

1.样本制备

使用含1% CHAPS的变性裂解液(抑制烯醇化酶聚合);

脑组织样本需增加超声破碎步骤(10秒×3次);

2.电泳条件

12% SDS-PAGE凝胶,100V恒压电泳90分钟;

3.抗体孵育

推荐稀释比1:1500(5% BSA封闭),4℃过夜孵育;

4.问题排查

若出现<40 kDa条带,建议添加1 mM PMSF防止降解;


用户真实反馈

案例1(神经肿瘤研究):

案例2(基础研究):


文献支持与独立验证

1.文献引用:《Neuro-Oncology》2023年研究

优品生物NSE抗体用于证实胶质瘤干细胞的代谢重编程机制(WB数据CV值<8%);


2.《Journal of Neurochemistry》2022年研究

研究团队采用优品生物NSE抗体(货号YP-NSE-002)发现缺血性脑卒中后血脑屏障破坏与NSE释放动态相关(r=0.79, p<0.001);


优品生物NSE抗体通过WB专项验证体系(基因沉默验证+多组织测试+低丰度检测),

为神经肿瘤研究提供可靠工具。我们承诺持续优化抗体性能,并欢迎用户提交个性化测评需求。


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2.Human SKP2

SKP2(S-phase kinase-associated protein 2)是SCF泛素连接酶复合体的关键组分,在细胞周期调控、蛋白降解和肿瘤发生中发挥核心作用。其理论分子量为45 kDa,但在WB实验中常面临以下挑战:

迁移位置异常:因磷酸化修饰或复合物形成出现条带偏移(40-50 kDa);


非特异性条带:与SKP1、CUL1等SCF复合体成员交叉反应;


细胞周期依赖性表达:S期表达量显著升高,需同步化处理;


WB应用测评设计


测评维度


对比品牌

主流品牌:Abcam、CST

国产品牌:优品生物

关键结论:

细胞周期检测优势:优品生物SKP2抗体可清晰区分G1期和S期表达差异;


进口品牌同级性能:在特异性、背景洁净度等关键指标上与Abcam、CST相当;


复合物识别特异性:不与其他SCF复合体成员发生交叉反应;


超高性价比:价格仅为进口品牌的40%,适合长期追踪实验;


实验方案优化建议

1.样本制备

使用双胸苷阻断法获得S期同步化细胞;

添加MG132(10 μM)防止蛋白降解;

2.电泳条件

10% SDS-PAGE凝胶,90 V恒压电泳110分钟;

3.抗体孵育

推荐稀释比1:1500(5% BSA封闭),4℃过夜孵育;

4.问题排查

若出现>50kDa条带,建议增加DTT浓度至50mM;


用户真实反馈

案例1(细胞周期研究):

案例2(癌症研究):


优品生物SKP2抗体通过细胞周期验证体系(同步化细胞测试+SCF复合体特异性验证+多组织检测),

为细胞周期和肿瘤研究提供专业工具。现提供免费技术支持和实验方案优化服务。


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3.Human EZR

EZR(Ezrin)是ERM蛋白家族的核心成员,在细胞骨架重组、细胞迁移和信号转导中发挥关键作用。其理论分子量为81 kDa,但在WB实验中常面临以下挑战:

迁移位置异常:因磷酸化修饰或蛋白降解导致条带偏移(70-90 kDa);


非特异性条带:与Radixin、Moesin等同源蛋白交叉反应;


构象多样性:开放/闭合构象变化影响抗体识别效率;

WB应用测评设计


测评维度


对比品牌

主流品牌:Abcam、CST

国产品牌:优品生物

关键结论:


构象识别优势:优品生物EZR抗体可同时识别开放和闭合构象,检测灵敏度提升20%;

进口品牌同级性能:在特异性、条带锐利度等关键指标上与Abcam、CST相当;

修饰耐受性:不同磷酸化状态下均能稳定检测81 kDa主条带;

超高性价比:价格仅为进口品牌的1/3,特别适合大规模筛查实验;


实验方案优化建议

1

样本制备

使用含0.5% Triton X-100的膜蛋白提取缓冲液;

添加蛋白酶抑制剂cocktail(防止降解);

2

电泳条件

8%SDS-PAGE凝胶,90V恒压电泳100分钟;

3

抗体孵育

推荐稀释比1:2000(3%脱脂牛奶封闭),室温摇育2小时;

4

问题排查

若出现70 kDa降解条带,建议新鲜制备样本并立即检测;


用户真实反馈

案例1(细胞迁移研究):

案例2(肿瘤研究):


优品生物EZR抗体通过构象特异性验证体系(构象敏感性测试+膜蛋白提取优化+多组织验证),

为细胞骨架和转移研究提供专业解决方案。现提供免费技术咨询和实验方案设计服务。


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