发布时间:2025-06-11
每次跑WB前最纠结什么?
首先不是样本处理,也不是抗体选择而是——胶到底该提前配还是现配?!今天就让本科研狗用500+次实验经验告诉你答案!
1
提前配胶
优点:可以批量配,配一次,跑几天,方便,省时省事。
缺点:保存不当可能导致干胶,电泳速度变慢或条带扭曲等情况。
使用建议
为了减少保存过程中的问题,应将充分凝固的胶放在去离子水或电泳液中完全浸没。去离子水可以防止凝胶干燥,同时避免引入其他杂质。将其置于4℃冰箱中保存,低温环境有助于减缓凝胶中成分的变化速度。但需要注意的是,即使采取了这些措施,也应尽量在3天内使用凝胶,以确保获得较好的实验结果。
2
现配现用
优点:相对稳定,无需担心胶还能不能用的问题。
缺点:有点费时费事,另外如果着急的时候,没有等够时间,未充分凝固,会造成胶孔不平或有絮状物影响上样。
(在不赶时间时,此方式应作为首选)
3
综合比较与选择建议
实验结果差异
在操作得当的情况下,在3天内使用两种方式其实没有太大差别。这意味着如果能够满足各自的操作要求,无论是提前配胶还是现配现用,都可以获得较为满意的实验结果。
选择依据
实验室习惯和资源:每个实验室都有自己的工作习惯和资源配置。如果实验室人员充足,时间相对宽松,且注重实验结果的准确性和稳定性,现配现用可能是更好的选择。相反,如果实验室需要处理大量样本,且时间紧迫,提前配胶可以提高工作效率,但需要注意严格控制保存条件。
试剂和环境因素:不同品牌的试剂可能会对配胶和电泳结果产生影响。有些试剂可能更适合现配现用,而有些则在提前配胶时表现更好。此外,实验室的环境温度、湿度等因素也需要考虑。例如,在高温潮湿的环境下,提前配胶的保存难度可能会增加,此时现配现用可能更为合适。
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