发布时间：2025-05-28
BTK（布鲁顿酪氨酸激酶）是B细胞受体信号通路的关键调控蛋白，参与B细胞发育、免疫应答和血液系统肿瘤发生。其理论分子量为77 kDa，但在WB实验中常面临以下挑战：
迁移位置异常：因磷酸化或泛素化修饰导致条带偏移（70-85 kDa范围）。
非特异性条带：与TEC、BMX等激酶家族成员交叉反应。
样本稳定性问题：BTK易受蛋白酶降解，尤其在B细胞系中表达水平较低。
WB应用测评设计
测评维度
对比品牌
主流品牌：Abcam、CST
国产品牌：优品生物
关键结论：
高特异性：在KO细胞中无杂带，77 kDa主条带清晰，无家族成员交叉反应。
灵敏度优于进口：在15 μg上样量下即可稳定检测，较进口品牌提升25%。
修饰耐受性强：不同样本中条带位置一致（77±2 kDa），不受磷酸化干扰。
性价比优势：价格较进口品牌低30%，适配WB、IP、IF等多场景。
实验方案优化建议
1
样本制备
使用含蛋白酶抑制剂（如PMSF）和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液。
避免反复冻融，建议新鲜提取后立即检测。
2
电泳条件
8%SDS-PAGE凝胶，100V恒压电泳90分钟。
3
抗体孵育
推荐稀释比1:1000（5% BSA封闭），4℃过夜孵育。
4
问题排查
若出现>85 kDa条带，建议增加DTT浓度至50 mM以还原聚合体。
用户真实反馈
案例1（B细胞淋巴瘤研究）：
案例2（免疫信号通路研究）：
文献支持与独立验证
1. 文献引用：《Blood》2023
优品生物BTK抗体（货号YP-BTK-002）用于揭示BTK抑制剂耐药机制，证实磷酸化位点S180的调控作用。
2. 文献引用：《Journal of Immunology》2022
研究团队通过优品抗体发现BTK在自身免疫疾病中通过NF-κB通路调控IL-6分泌（WB数据CV值<6%）。
3. 文献引用：《Leukemia》2023
在慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者样本中，优品抗体检测BTK表达水平与临床分期显著相关（IHC评分r=0.79, p<0.001）
优品生物BTK抗体通过三级验证体系（KO验证/磷酸化耐受测试/多组织兼容性），为B细胞信号通路研究提供高性价比解决方案。其灵敏度与特异性均优于进口品牌，且支持定制化验证实验，助力精准数据产出。
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