发布时间:2025-04-28
✦你的抗体真的能"一次性使用"吗?✦
"做完WB,抗体还能再用吗?"——这可能是许多科研人藏在心里的疑问。毕竟,一管优质抗体动辄上千元,如果只用一次就丢弃,不仅心疼钱包,还违背了"勤俭科研"的原则。
但抗体重复使用真的可行吗?会不会影响实验结果?今天,我们就来揭秘WB抗体的重复使用技巧,帮你省下科研经费,还能保证数据可靠性!
✦抗体能重复使用吗?
答案是:可以!✦
是的,大部分抗体在适当保存条件下是可以重复使用的!尤其是单价较高的一抗,合理回收利用能显著降低实验成本。但关键在于——如何正确操作?
1. 一抗的重复使用
一抗通常比二抗更昂贵,因此重复使用价值更高。以下是一些实用建议:
保存条件:回收的一抗应加入0.02% NaN₃(叠氮化钠)防止细菌污染,并存放于4℃(短期)或-20℃(长期)。
使用次数:一般可重复使用3-5次,但需注意信号是否减弱。如果曝光时间明显延长,建议更换新抗体。
注意交叉污染:不同蛋白的抗体不建议混合回收,避免影响特异性。
2. 二抗的重复使用
一抗通常比二抗更昂贵,因此重复使用价值更高。以下是一些实用建议:
保存条件:回收的一抗应加入0.02% NaN₃(叠氮化钠)防止细菌污染,并存放于4℃(短期)或-20℃(长期)。
使用次数:一般可重复使用3-5次,但需注意信号是否减弱。如果曝光时间明显延长,建议更换新抗体。
注意交叉污染:不同蛋白的抗体不建议混合回收,避免影响特异性。
3. 关键注意事项
膜的处理:每次实验后,务必彻底洗膜(TBST或PBST),避免残留蛋白干扰下次结果。
信号对比:每次重复使用抗体时,建议跑一个内参蛋白(如β-actin、GAPDH)作为对照,确保抗体活性未显著下降。
避免反复冻融:抗体反复冻融易导致聚集或失活,建议分装保存。
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质量控制:我们制造抗体的过程中涉及到严格的质量控制步骤,确保每一批次的产品均符合预期的效能要求
高特异性:我们的抗体能精确识别目标抗原,减少非特异性结合,从而提高实验数据的可信度。
高灵敏度:我们抗体在低浓度下也能检测到抗原存在,适用于需要极端灵敏度的实验,如ELISA检测等。
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再现性好:我们同一批次的单克隆抗体可以提供高度一致的结果,促进实验重复性。
易于标记:我们抗体易于与酶、荧光染料等标记物结合,用于信号的放大和可视化,便于实验结果的解读。
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